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DSI846Ra01视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠模型

一．模型简介：

视网膜缺血再灌注损伤（Retinal Ischemia-Reperfusion Injury, RIRI）是指视网膜组织在经历短暂缺血后，血流恢复反而加重组织损伤的病理过程。该损伤是青光眼、糖尿病视网膜病变、视网膜中央动脉阻塞、眼部手术并发症等多种致盲性眼病共同的核心病理环节。在缺血阶段，视网膜神经节细胞（RGCs）、胶质细胞及血管内皮细胞率先陷入能量代谢衰竭；而恢复血供后，氧化应激、炎症浸润、钙超载、细胞凋亡与焦亡信号迅速爆发，最终导致视网膜结构不可逆破坏和视觉功能永久丧失。由于人类视网膜样本获取受限、体外细胞模型难以模拟神经--血管--胶质网络微环境，标准化、可重复、高稳定性的 RIRI 大鼠模型，已成为连接基础机制研究与临床转化不可或缺的核心环节。

构建稳定可靠、结果一致的RIRI动物模型，是阐明发病机制、开发神经保护药物、验证新型治疗方案的关键前提。云克隆依托 SPF 级动物平台、标准化操作流程（SOP）与全链条检测体系，打造高一致性 RIRI 大鼠模型，为全球科研与药企提供从建模、鉴定到机制验证、药效评价的一站式解决方案。

• 材料：

1.货号：DSI846Ra01

2.实验动物：SPF级SD大鼠，雄性，周龄为6w~8w，体重为220~250g。

三．模型制作方法：

本模型推荐采用前房加压灌注法构建，具体操作步骤如下：

术前准备：腹腔注射戊巴比妥钠（40 mg/kg）全身麻醉；盐酸丙美卡因滴眼液表面麻醉；复方托吡卡胺充分散瞳；左氧氟沙星滴眼液清洁结膜囊，预防术后感染。

建模流程：在无菌条件下，30G 微量针头自颞侧角膜缘平稳刺入前房（避免损伤晶状体与虹膜），针头连接生理盐水输液系统，缓慢升高液瓶至角膜顶点 150~180 cm，使眼内压稳定升至110~130 mmHg；以眼底苍白、血管闭塞为缺血成功标志，持续加压60 min.完成后缓慢降低液瓶至眼水平，恢复灌注，拔出针头，抗生素眼膏保护角膜。

假手术组仅穿刺前房，不升高眼压，其余操作一致。

模型成功标志：造模过程中视网膜由红润变为苍白，再灌注后血流恢复、颜色回转为正常，即视为建模初步成功。

注意事项：

1. 无菌操作：全程无菌操作，术后强化抗感染，最大限度降低角膜损伤与眼内炎风险；
2. 体温维持：使用加热垫维持肛温36.5～37.0℃，有效减少麻醉及缺血应激对实验结果的干扰；
3. 操作轻柔：精细规避前房出血与晶状体混浊，显著提升模型合格率与批次间一致性。

四．模型评估：

云克隆提供覆盖组织、细胞、蛋白、基因全层次的标准化鉴定方案，确保模型质量可靠、数据可追溯：

1. 大体与眼底观察

缺血期：眼球苍白、眼底反光消失、视网膜血管闭塞；

再灌注后：眼底逐步恢复红润，血管重新充盈，动态过程清晰可辨。

2. 组织形态学鉴定

RIRI模型组视网膜呈现典型时间依赖性病理演变：

再灌注早期（6～24 h）：视网膜内层（神经纤维层和内丛状层）高度水肿、显著增厚，呈“淡染水肿”表现；

再灌注24 h及以后：水肿消退，视网膜整体变薄，神经节细胞（RGCs）数量急剧减少、排列紊乱，内核层萎缩；

晚期：神经纤维层出现空泡样变，色素上皮层细胞疏散无序，视网膜结构完整性严重破坏。

3.免疫荧光 / 免疫组化：Brn3a 标记 RGCs 数量显著下降；Iba1 显示小胶质细胞活化；GFAP 提示胶质纤维增生。

4. 细胞凋亡检测

TUNEL 染色显示神经节细胞层与内核层凋亡细胞显著增多；Caspase-3、Bax/Bcl-2 表达上调。

5. 分子生物学鉴定

qPCR、Western blot、ELISA 检测：炎症因子（IL-1β、TNF-α、IL-6）、氧化应激指标（ROS、MDA、SOD）、凋亡相关蛋白、铁死亡 / 焦亡标志物显著异常。

图一：视网膜HE染色对比（上：对照组；下：模型组）

• 广泛的应用场景

1. 神经保护药物药效评价与筛选

适用于小分子化合物、天然产物、多肽、蛋白药物、中药复方等的视网膜保护效果评价。已成功支持多种药物的体内药效验证，覆盖病理改善、凋亡抑制、炎症下调、ERG 功能恢复等多维度评价。

2. 青光眼等缺血性眼病机制研究

RIRI是急性闭角型青光眼的核心病理过程，本模型被广泛用于探索小胶质细胞活化、NLRP3炎症小体组装、氧化应激网络等在青光眼神经退行性变中的关键作用。

3. 信号通路与分子机制解析

支持Nrf2/HO-1、JAK-STAT、TLR4/NF-κB/NLRP3、TGF-β/Smad 等重要通路的体内功能验证，为新靶点发现与机制确证提供权威在体平台。

4. 转化医学与临床前研究

具备高度临床相关性，是连接基础研究与临床转化的理想模型。可用于基因治疗、干细胞治疗、外泌体、新型给药系统等前沿疗法的临床前安全性与有效性验证，为临床转化提供可靠数据支撑。

六．结语

视网膜缺血再灌注损伤是多种致盲性眼病的共同病理通路，而稳定可靠的动物模型则是突破该领域研究瓶颈的关键所在。云克隆大鼠RIRI模型（DSI846Ra01）以前房加压灌注法为核心技术，配套完善的HE染色、TUNEL凋亡检测、免疫组化、分子生物学等评价体系，为全球眼科研究者提供从组织病理到分子机制的全链条研究工具。

云克隆公司拥有SPF级动物中心、严格SOP操作规范、多维度鉴定体系及一站式检测平台，确保模型的高成功率、高重复性与高匹配度。同时，我们同步提供配套抗体、重组蛋白、ELISA试剂盒、病理检测及分子生物学技术支持，助力眼科科研高效突破，加速创新成果从基础走向临床。