一、基本信息
- 英文全称:ANF (1-24) (frog)
- 中文全称:蛙源心房利钠因子(1-24),蛙类心房钠尿肽 1-24
- 三字母序列:Ser-Ser-Asp-Cys-Phe-Gly-Ser-Arg-Ile-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Met-Gly-Cys-Gly-Arg-Arg-Phe
- 单字母序列:SSDCFGSRIDRIGAQSGMGCGRRPF
- 氨基酸总数:24 aa
- 分子式:C103H167N37O34S3
- 分子量:2563.87
- 共价修饰说明:
分子内二硫键配对:Cys4 ↔ Cys20
线性链通过二硫键形成保守环结构;无 N 端乙酰化、无 C 端酰胺、无生物素 / 荧光标记。
结构式:
二、理化性质
- 紫外定量:含 Phe,280 nm 有紫外吸收,可分光光度检测;无 Tyr/Trp,吸收强度偏低。
- 氧化敏感位点:含 Met 甲硫氨酸、一对成环 Cys;易被氧化失活,全程避光、减少溶液接触空气。
- 电荷分布(pH7.4)
酸性残基:Asp3、Asp10;碱性残基:Arg8、Arg11、Arg22、Arg23;整体带正电;适配 pH 6.5–7.4 PBS、两栖类生理缓冲液。 - 溶解性:大量 Ser/Gln 亲水残基,中性水缓冲液溶解良好;不可使用还原剂溶解。
- 空间构象:Cys4-Cys20 二硫键维持钠尿肽特征环状核心,环区为受体结合必需结构;蛙源序列与人 / 犬 ANF 同源但氨基酸存在多处物种差异,受体亲和力、代谢稳定性与哺乳动物 ANF 存在区别。
三、生物学背景
蛙源 ANF (1-24) 是两栖动物特异性心房钠尿肽,区别于人 / 犬 28 aa ANF;主要由蛙心房组织分泌,调控两栖动物水盐平衡、皮肤渗透、肾脏利尿、血管舒张,常用于脊椎动物钠尿肽进化对比研究。
环状区域为受体识别核心,可结合两栖类 NPR 同源受体,产生利钠、舒张血管生物学效应。
四、生物学功能
- 特异性激活蛙源钠尿肽受体,介导肾脏利钠利尿、外周血管平滑肌舒张;
- 调控两栖动物皮肤离子转运、渗透压稳态;
- 用于脊椎动物 ANP 家族跨物种进化、受体物种选择性构效研究。
五、科研应用
- 两栖动物心血管、渗透压生理体外功能实验;
- 人 / 犬 / 蛙 ANF 跨物种活性对比;
- 钠尿肽受体物种选择性、结构进化分析;
- 低等脊椎动物水盐调节通路机制研究。
六、溶解与储存规范
- 溶解溶剂:无菌 pH7.2 PBS 常温配制;严禁 DTT、β-ME 等还原剂,避免二硫键断裂;
- 冻干粉保存:短期密封 - 20 ℃避光;长期分装 - 80 ℃避光;
- 工作液:禁止反复冻融,2–8 ℃避光存放不超过 4 天,功能实验现配为佳。